Efectul antibacterian al Nigella Sativa

Oamenii au recunoscut și folosit de mult timp plantele pentru hrană și pentru tratarea diferitelor boli.

Chiar și astăzi, știința confirmă diferitele virtuți ale plantelor aromatice și ale uleiurilor lor esențiale și ale extractelor lor brute ale căror domenii de aplicare sunt foarte variate și care sunt utilizate pe scară largă în industria alimentară ca aditivi, precum și în industria cosmetică, parfumerie, săpun și detergenți în impresionante volum. De asemenea, fac parte din compoziția mai multor medicamente, sub formă de creme, capsule și supozitoare. Utilizarea lor se numește „aromaterapie”, care constă în utilizarea uleiurilor esențiale pentru tratamentul diferitelor manifestări patologice (YAHIAOUI, 2005).

În ultimii ani, mai multe motive au dus la restabilirea utilizării plantelor medicinale. Ele sunt mai întâi la un cost mai mic decât medicamentele sintetice, de asemenea, vin într-un moment în care publicul este dezamăgit de medicina modernă, care de fapt nu mai găsește un remediu pentru toate bolile, în plus față de rezistența crescută a agenților patogeni și o serie de reacții adverse asociate cu utilizarea medicamentelor tradiționale.

Nigella sativa este una dintre cele mai utilizate plante medicinale din întreaga lume. Extractele din semințe ale acestei plante au fost utilizate pe scară largă în medicina tradițională de secole împotriva unei multitudini de afecțiuni și, în special, ca antidiabetic, antihipertensiv și antiinflamator. Studii recente evidențiază proprietățile antimicrobiene ale acestor boabe.

În acest sens, vinurile considerate utile pentru a contribui la studiul eficacității antibacteriene și antifungice a uleiurilor esențiale, a extractelor brute, a uleiurilor fixe, a uleiurilor comerciale obținute prin extracția boabelor Nigella sativa pe unii germeni patogeni precum Escherichia coli, Pseudomonas aeroginosa, Staphylococcus aures și Candida albicans.

Extragerea uleiurilor esențiale, a uleiurilor fixe și a extractelor brute se efectuează în laboratorul Universității Kasdi Merbah Ouargla. În timp ce testul efectului lor antimicrobian și antifungic asupra unor germeni patogeni se efectuează în laboratorul spitalului Slimane Amirat Touggourt.

1- uleiuri esențiale

1 .1- Definiția uleiurilor esențiale

Uleiurile esențiale sunt amestecuri complexe de substanțe organice lichide aromatice care se găsesc în mod natural în diferite părți ale plantelor. Sunt foarte concentrate, volatile, neolioase și sensibile la descompunere sub efectul căldurii.

În prezent, utilizarea lor în parfumerie și alimente este considerabilă; de aceea anumite organisme de standardizare AFNOUR NF și ISO au dat o definiție mult mai precisă a uleiurilor esențiale; uleiul esențial este un produs obținut din hidrodistilație. Uleiul esențial este separat de faza apoasă prin metode fizice. Această definiție este restrictivă, pe de o parte, produsele mirositoare de origine animală și, pe de altă parte, esențele obținute prin alte procese de extracție. (HAMMOUDI, 2008).

1.2-Distribuție

Uleiurile esențiale pot fi depozitate în diferite flori (oregano), cu frunze (lemongrass), scoarță (scorțișoară), lemn (bios de trandafiri), rizomi (anason dulce), fructe (anason stelat) sau boabe de chimen. (DEGRYSE și colab., 2008).

1.3- Activități biologice ale uleiurilor esențiale

Uleiurile esențiale au multe activități biologice. În medicina pe bază de plante, acestea sunt utilizate pentru proprietățile lor antiseptice împotriva bolilor infecțioase de origine bacteriană, de exemplu împotriva bacteriilor endocanale sau în microflora vaginală și de origine fungică împotriva dermatofiților. (HAMMOUDI, 2008).

1.4- Clasificarea uleiurilor esențiale

În funcție de puterea specifică asupra germenilor microbieni și datorită indicelui aromatic obținut prin aromatograme, uleiurile esențiale sunt clasificate în grupe:

2.5- Locul și distribuția N. sativa

Nigella sativa

se găsește în multe locuri, de la estul mediteranean până la nordul

India. Este cultivat în mod obișnuit în Egipt, în mijloc

Figura 7. Ansamblu de extracție a hidrodistilației.

1. 3- Macerare cu acetonă

Extracția prin macerare este o extracție la rece. Este un contact simplu între suportul solid și solvent, separarea se face prin filtrare.Consistă în luarea a 50 g de boabe (pulbere) și macerarea lor în 300 ml de acetonă timp de 24 de ore (figura). Se realizează apoi sub vid folosind un balon de vid și pâlnie, filtratul colectat este supus evaporării în vid într-un rotor de abur echipat cu o pompă de vid pentru a îndepărta acetona. Prin urmare, amestecul constituie produsul de testat (Fig. 8) (AISSAOUI și MAAMRI, 2009).

Materie vegetală
Pulbere de semințe negre

Macerare cu acetonă 24h

Filtrare sub vid

Evaporarea sub vid

N. sativa extract brut

Figura 8. Diferite etape de extracție prin macerare a Nigella sativa

Figura 9. Extragerea prin macerare
aburi

Figura 10. Evaporarea sub vid prin
rotor

1.4- Extragerea uleiurilor fixe

Extracția uleiurilor fixe prin macerare este o extracție la rece. Este un contact simplu între suportul solid și solvent, separarea se face prin filtrare.Consistă în luarea a 10-20 g de boabe măcinate, acestea sunt macerate în 30 ml de acetonă timp de 24 de ore. Se filtrează o pâlnie apoi se pune amestec în congelare 24 H după congelare se observă un strat albicios sub

amestecați, păstrați acest strat și eliminați acetona (Fig. 11) (AISSAOUI și MAAMRI, 2009).

Figura 11. Extragerea uleiurilor fixe

1.5- Echipamente de laborator

tabelul 1. Materiale și produse utilizate în laborator

Materiale

Produse

Autoclavă, Baie de apă, Cântar electric, Microscop optic pentru cuptor, Frigider, Platină Petri, Spatulă, Balon, Pahar, Balon, Lamă lamelă, Pipete gradate, Încălzitor balon, Bec, Mortar, Hârtie de filtru, Agitator magnetic.

Agar, alcool, amidon, apă

distilat, Indol, Lugol, eter

Dietil, sulfat de sodiu
anhidru

1.6- Microorganismele testate

Tulpinile microbiene testate au fost furnizate de laboratorul de stabilire

Slimane Amirat, Touggourt, Acestea sunt clinici izolate responsabile de infecțiile nosocomiale. Prin urmare, am păstrat următoarele specii citate în tabel:

masa 2. Tulpinile microbiene utilizate

Bacterii

Drojdie

Staphylococcus aureus Pseudomonas aeroginosa

1.6.1- Bacil gram negativ

1.6.1.1- Pseudomonas aeroginosa

* - Habita

Este o bacterie răspândită în natură. Trăiește în apă și la sol, se găsește și în mediul spitalicesc, în special în locuri umede de chiuvete, săpunuri lichide, umidificatoare, soluții antiseptice (clorhexidină, clorură de benzelkoniu, cetrimidă în special). Pseudomonas aeruginosa se găsește în digestiv tract și mai rar în ser fiziologic (FAUCHERE și APRILIE, 2002).

* - Personaje principale

Bacil gram-negativ, mobil cu ciliatură polară monotrică, caracterizat prin pigmentare albastră, verde, sporulă, temperatură optimă: 30 până la 43 ° C, pH optim 6,5-8, aerob strict, chemoorganotrofic, oxide +, catalază +, gaz-, LDC -, ODC-, ADH +, géatuie +, psychrotrophic(FAUCHERE și APRILIE, 2002).

* - Patogenitate

Bacteriile pot provoca infecții, uneori severe, la persoanele cu apărare slăbită și pot provoca infecții urinare și bronșice. (Auciel et Vildé, 2005 în DELLARS, 2007). Responsabil pentru infecțiile pielii (impetigo, furuncule), infecția sferei ORL (sinuzită, otită.) Și diverse infecții (DELLARS, 2007).

* - Sensibilitate la antibiotice

Pseudomonas aeroginosa este o bacterie în general multirezistentă, antibioticele care pot avea o activitate bună sunt: ticarcilina, piperacilina, azolocilina, ceftazidima, cefuslodima, cefepima, imipenemul și aminoglicozidele.

Tulpinile rezistente la colistină sunt foarte rare. Ciprofloxacina este cea mai activă dintre chinolone. Activitatea tuturor acestor antibiotice nu este obișnuită și trebuie întotdeauna specificată prin antibiogramă (Fig. 12) (FAUCHERE și AVRIL, 2002).

Figura 12. Pseudomonas
Aeroginosa pe agar Cetrimide

1.6.1.2- Escherichia coli (colibacillus)

Bacil gram-negativ legat de Enterobacteriaceae. Familia E coli crește pe agar obișnuit. Indol +, uree-fermentează lactoza, gazifică, dar nu produce acetină(Fig.13).

* - Habitat

E. coli este o gazdă normală în tractul digestiv al oamenilor și animalelor.

La om, este prezent la o rată de 10 până la 10 bacterii/g de scaun, o densitate cu toate acestea mult mai mică decât cea a anaerobilor care constituie flora dominantă. Prezenta lui. coli din mediu asistă la contaminarea fecală (LAMARAT și YKRELEF, 2009). Patogenitate.

* - Infecții ale tractului urinar

Mai frecventă la femei datorită conciziei, la bărbați infecția este de obicei secundară unei obstrucții a tractului urinar.

* - Infecție intestinală

Responsabil de gastroenterită.

* - Infecție neonatală

Poate duce la meningită sau sepsis.

* - Diverse infecții

Escherichia coli este implicată în multe infecții începând de la tractul digestiv sau urinar, supurație localizată, acestea pot fi infecții comunitare

* - Sensibilitate la antibiotice

Bacteriile au fost inițial sensibile la multe antibiotice, dar dobândirea rezistenței este frecventă, în special în spitale. (Nauciel și vildé, 2005 în FAUCHERE și AVRIL, 2002). Cu toate acestea, rezistența la amino și carboxipeniciline prin producerea de penicilinază învinge 40 de tulpini, unele dintre aceste tulpini sunt rezistente la combinația amoxicilină-acid clavulainic pentru alte antibiotice, frecvențele de rezistență sunt scăzute, cu excepția sulfului (50%) și a tetraciclinelor %) și cloromfimcol (25%) (FAUCHERE și AVRIL, 2002).

Figura 13.Echirichia coli on
Hecktoen

1.6.2- Cocci gram pozitivi

1.6.2.1- Staphylococcus aureus

* - Habitat

Este un germen omniprezent, care se găsește în sol, în aer. Este un comensal al pielii și membranelor mucoase ale oamenilor.

Se găsește în stare normală în orofaringe, pasaje nazale, în scaun la nivelul

Perineu sau axile (Fig. 14) (FAUCHERE și AVRIL, 2002).

* - Personaje principale

Coci gram pozitivi, nemișcați, pigmentați în galben, nesporulați în ciorchini (ciorchini de struguri), G + C: 30-39%, temperatura optimă la 37 ° C, PH optim: 7,2-7,4,

NaCI: 7,5%, anaerob Facultativ, oxidază +, catalază+ (FAUCHERZ și AVRIL, 2002; NUCIEL și VILDE, 2005; DELLARRAS, 2007).

* - Patogenitate

Manifestările datorate Staphylococcus aureus sunt foarte numeroase, sunt supurații, necrotice sau enterice:

-supurații localizate.

- Manifestări digestive.

-sindromul șocului toxic (FAUCHERE și AVRIL, 2002).

* -Sensibilitate la antibiotice:

Tulpinile comunitare sunt în general rezistente la penicilinele G și A, dar sensibile la penicilinele M. Sunt deseori sensibile la macrolide, sinergiste, fluorochinolone(FAUCHERE și AVRIL, 2002).

Figura 14.Staphylococcus aureus pe
Chapman

1.6.3- Candida albicans

Este un organism viu în starea normală a gurii, vaginului și a tractului digestiv al ființei umane (TONY și PAUL, 1997).

* - Personaje principale

Candida albicas este cea mai faimoasă specie de drojdie. În laboratorul medical, cultura într-o cutie Petri dă colonii mari, rotunde, albe sau de culoare crem, care cresc bine pe mediul sabouraud sau pe agar de sânge. (Fig. 15) (CHAKON și BASSOU, 2005).

* - Patogenitate

* - Candidoza

Principalul agent patogen este Candida albicans responsabilă de infecții superficiale, precum și infecții sistemice. Acestea din urmă sunt adesea doar la indivizii imunocompromiși. Face parte din flora normală a intestinului, infecțiile superficiale includ aftele (pe membrana mucoasă). Bucală), vulvovaginita Patogeneza Candida albicans este legată de faza filamentoasă. Această drojdie poate provoca infecții ale vaginului, gurii sau plămânilor.

* -Sensibilitate la antibiotice

Candida patogenă a devenit rezistentă la toate antifungicele utilizate în prezent.

Figura 15.Candida albicans

1.7- Studiul puterii antimicrobiene a uleiului de Nigella sativa

Metoda de evaluare a puterii antimicrobiene a uleiurilor esențiale, a extractului brut, a uleiului fix și a uleiului comercial de Nigella sativa.

1.7.1- Evaluarea puterii antibacteriene

Pentru a determina sensibilitatea tulpinilor.

1.7.2- Metoda de difuzie a agarului

1.7.3- Tehnica discului

Tehnica de difuzie pe mediu agar, constă în punerea pe medii a culturilor specifice de agenți microbieni de contact a substanței naturale sau chimice pentru a aprecia efectul lor antiseptic.

* - Pregătirea mediului de cultură (Muller Hinton) pentru testul biologic

Infuzie de vită 3, 00g

Hidrolizat de cazeină 17,5g

Apă distilată qsp1L

* - pregătirea inoculului

Două până la trei colonii pure și bine izolate sunt pre-spălate folosind o buclă de platină și descărcate într-un tub care conține 5 ml de ser fiziologic steril.

* - Semănat

Pe vasele care conțin mediul de agar MH pe o grosime de 4mm bine uscat,

Vă prezentăm 3 la 5 ml de inocul. Se obține astfel o împrăștiere uniformă într-o foaie. Excesul de lichid este aspirat cu ajutorul unei pipete pasteur și descărcat într-un rezervor de înălbitor și cutiile sunt lăsate să se usuce pentru 15 minute.

* - Aplicarea discurilor

În fiecare cutie sunt plasate discuri sterile impregnate cu ulei esențial, extract brut, ulei fix și ulei comercial de Nigella sativa.

* - Incubație

Vasele sunt incubate între 18 și 24 la 37 ° C.

* - Cititor

Constă în măsurarea cu precizie a diametrelor zonelor de inhibare folosind o riglă în afara cutiei.

2- Rezultat și discuție

2.1- Rezultate

2.1.1- Examinarea organoleptică

Caracteristicile organoleptice ale uleiului esențial, extractului brut, uleiului fix și uleiului comercial de Nigella sativa obținut prin hidrodistilare și macerare la rece cu acetonă sunt reprezentate în tabelul 3:

Tabelul 3.Proprietăți organoleptice ale EB, HC, HF și HC